ELISA
Définition
Le terme ELISA vient de Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. Il s'agit d'un procédé (immuno absorption enzymatique) qui permet de doser les antigènes (corps considéré comme étranger par l'organisme) et les anticorps grâce à l'utilisation d'un marqueur (molécule dont la détection permet d'identifier ces éléments). Dans la méthode ELISA, ces marqueurs sont des enzymes.
Cette méthode permet de détecter les immunoglobulines (anticorps) qui sont dirigées contre un virus ou une bactérie. Autrement dit, le test d'ELISA va permettre de savoir si une personne est affectée ou pas par un micro-organisme.
L'individu est considéré comme séropositif quand il existe une infection, et séronégatif dans le cas inverse.
Le test ELISA sert notamment à mettre en évidence une séropositivité quand un individu a été au contact du VIH (virus du sida).
Le test ELISA doit être vérifié par la réaction de Western Blot. La réaction de Western Blot est une technique qui permet de rechercher dans le sérum sanguin (partie liquidienne du sang), des protéines antigéniques et tout particulièrement des protéines issues d'un virus ou encore des anticorps dirigés contre ces protéines. La technique de Western Blot se déroule en trois étapes. La première étape consiste à isoler les protéines contenues dans le sang grâce à une électrophorèse, c'est-à-dire un déplacement des particules soumises à un champ électrique. Ceci s'effectue sur un support chimique (le gel de polyacrylamide). On voit alors les protéines se déplacer (migrer) à une distance en relation directe avec leur poids moléculaire. C'est-à-dire que plus le poids moléculaire est faible, plus la protéine va migrer loin. La deuxième étape consiste à accrocher les molécules ainsi séparées sur une membrane de nitrocellulose. La troisième étape est destinée à mettre en évidence les protéines grâce au dépôt d'anticorps mariés à une enzyme qui elle-même a été radio-marquée sur la membrane de nitrocellulose. La mise en évidence des protéines est possible grâce à la fixation de ces enzymes marquées sur les protéines précédemment individualisées.