Réaction de Western-Blot

Définition

Définition

Technique qui permet de rechercher dans le sérum sanguin (partie liquidienne du sang) des protéines antigéniques et tout particulièrement des protéines issues d'un virus ou des anticorps dirigés contre les protéines du virus.

Examen médical

Technique

La technique de Western Blot se déroule en trois étapes.

  • 1. La première étape consiste à isoler les protéines contenues dans le sang grâce à une électrophorèse, c'est-à-dire un déplacement des particules soumises à un champ électrique. Ceci s'effectue sur un support chimique (le gel de polyacrylamide). On voit alors les protéines se déplacer (migrer) à une distance en relation directe avec leur poids moléculaire. C'est-à-dire que plus le poids moléculaire est faible, plus la protéine va migrer loin.
  • 2. La deuxième étape consiste à accrocher sur une membrane nitrocellulose les molécules ainsi séparées.
  • 3. La troisième étape est destinée à mettre en évidence les protéines grâce au dépôt d'anticorps mariés à une enzyme qui elle-même a été radio-marquée sur la membrane nitrocellulose. Grâce à la fixation de ces enzymes marquées sur les protéines précédemment individualisées, il est possible de les mettre en évidence.

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